الكشف الجزيئي وتحديد وجود النيبو فيروس (Nepoviruses) في الضفة الغربية-فلسطين

كرمة العنب (Vitis vinefira) تنتمي الى عائلة Vitaceae، تعد عالميا واحدة من أقدم محاصيل الفاكهة، في حين تحتل في فلسطين المرتبة الثانية بين محاصيل الفاكهة المزروعة هناك بعد الزيتون. وبسبب الاستخدام المتواصل لطريقة التكاثر الخضري، تعد مزارع العنب هدفاً متواصلاً للعديد من الفيروسات، واحدة منهم هي من اكثر الامراض فتكاً بشجرة العنب وتسبب اضرارا كبيرة، مؤدية لمرض الاوراق المروحية (Fanleaf) التي تنتمى لمجموعة من الفيروسات تسمى النيبو فيروس (Nepovirus)، وتنتقل الى الكرمة بشكل رئيسي عن طريق الديدان الخيطية. الهدف من هذه الدراسة هو تقييم الوضع الصحي لشجرة العنب في فلسطين نظرا لعدد وجود بيانات حالية معتمدة لمدى انتشاره. أجريت عملية مسح ميدانية لكروم العنب الرئيسية في الضفة الغربية- فلسطين، وتم جمع نحو 80 عينة: الخليل (34)، بيت لحم (24)، جنين (11)، نابلس (7) وأريحا (3)، لمراقبة الأعراض خلال في الموسمين 2015 و2016 للكشف عن GFLV، وذلك باستخدام تقنيات حيوية وجزيئية في جامعة النجاح الوطنية - مختبرات التقنيات الحيوية. لمراقبة الأعراض وتحديد الاشجار المصابة. عملية المسح كشفت وجود اعراض مرتبطة بوجود الفيروسات ومن هذه الأعراض (الاصفرار، التشوه، المسافات بين العقد غير متساوية وتفرعات غير طبيعية، التبقيع، الاوراق المتقزمة). تم اختبار 25 عينة باستخدام التلقيح الميكانيكي لنباتات عشبية كاشفة. كل من النباتين (Necotiana benthemiana, Necotiana accidentalis) فشل في عزل فيروس الورقة المروحية GFLV على الرغم من ظهور اعراض لنباتين متقزمين على N. benthemiana فقط. ومع ذلك هي لا تدل على وجود هذا الفيروس. باستخدام تقنية الناسخ العكسي-تفاعل البلمرة المتسلسل RT-PCR ولا عينة من مجمل 55 عينة وجدت فيها أي اصابة بفيروس الورقة المروحية GFLV وذلك باستخدام بادئة (primers) مخصص لمضاعفة هذا الفيروس. بادئة اخرى استخدمت في الكشف عن المجموعة الفرعية A لمجموعة فيروسات النيبو فيروس Nepovirus))، تم الكشف عن (12) عينة مصابة من مختلف المناطق: الخليل (5)، بيت لحم (3)، أريحا (2)، جنين (1)، بينما لم يتم اكتشاف أي إصابة في عينات نابلس. تأكد هذه النتائج أنه تم العثور على Nepoviruses، في الكروم لدينا ولكن ليس بالنسبة لفيروس الورقة المروحية GFLV وهذا يؤكد ما تم الوصول اليه في محاولات اجريت في عقود سابقة تتوقع وجود GFLV في الكروم الفلسطينية. نتائج هذه الدراسة ممكن ان تكون بمثابة تقرير موثق للوضع الصحي للعنب بالنسبة لفيروس GFLV، على الرغم من وجود انواع اخرى من Nepoviruses التي تم الكشف عنها في العديد من الكروم من شأنه أن يفتح الباب لمزيد من الدراسات التي ستجري لتحديد هويتهم. الكلمات الرئيسية: النيبو فيروس، النباتات الكاشفة، الناسخ العكسي_تفاعل البلمرة المتسلسل، كرمة العنب، فيروس الورقة المروحية.